Ce cryo-microscope électronique à transmission est en effet un outil de choix permettant de valider vos hypothèses biologiques au niveau moléculaire. Complémentaire des technologies de biologie structurale que sont la RMN et la crystallographie, l'analyse des particules isolées par cryo-ME (cryo-microscopie électronique) a permis ces dernières années l'analyse structurale des macro-molécules biologiques jusque-là difficilement accessibles. Ainsi la technique est particulièrement bien adaptée à l'étude des protéines membranaires, des complexes protéiques (seuls ou associés aux acides nucléiques), des assemblages fibreux (amyloïdes...).
Un nouvel équipement qui met la biologie structurale à portée de tous !
L'IECB vous présente le Glacios2, cryo-microscope à transmission électronique de dernière génération permettant l'analyse des particules isolées et la cryo-tomographie électronique à très haute résolution.
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1. Apoferritine (4 uL à 2.5 mg/mL) imagée à x130k (pixel = 0.885 Å). ~2500 films collectés en 5 heures
Le Glacios2, installé fin 2024, bénéficie de nombreuses améliorations par rapport à la génération de microscopes précédente (AFIS, FFI, caméra Flacon 4i) lui permettant d'atteindre un très haut débit horaire d'acquisition d'images. Cela facilite la détermination de structures en haute résolution (<3 Å) et permet l'accès aux conformations minoritaires, ouvrant la voie aux analyses dynamiques.
Equipé d'un filtre à perte d'énergie SelectrisX, le Glacios2 est également performant en imagerie intracellulaire à haute résolution, pré-requis à la biologie structurale in vivo par cryo-tomographie électronique.
L'utilisation d'outils de prédiction structurale tels qu'AlphaFold a permis de développer de nouvelles hypothèses biologiques au niveau moléculaire. L'analyse par cryo-ME permet leur validation !
2. Classes 2D moyennes issues des particules collectées (~2.7 millions particules, résolution moyenne 3.5 Å)
Fiche technique du Glacios2:
- Tension d'accélération de 200 kV (point FEG)
- Chargement automatique jusqu'à 12 échantillons cryogénisés (Autoloader)
- Platine porte-échantillon modifiée FFI (Fringe-Free Imaging) : densité d'acquisition améliorée
- Imagerie AFIS (Aberration-Free Image Shift) étendue : haute fréquence d'acquisition
- Caméra Falcon4i DED (Direct electron Detector) de dernière génération : haute résolution et haute fréquence d'acquisition
- Filtre à perte d'énergie SelectrisX : amélioration du contraste
3. Carte de densité finale (résolution ~2.6 Å)
Contact
Dr Axel Siroy, IR
Crédits photos et illustrations : Axel Siroy